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      近年來，隨著畜禽和水產養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，抗生素的濫用引起了廣泛的關注。四環(huán)素類抗生素是一種由放線菌產生的廣譜抗菌素，喹諾酮是通過抑制DNA旋轉酶的活性殺滅細菌的一類人工合成化合物，磺胺類可以對于細菌感染類疾病進行有效治療，這三類抗生素在養(yǎng)殖業(yè)中被廣泛用于預防、治療畜禽、水產的疾病和促進生長。由于抗生素在動物機體組織中的殘留，人食用動物組織后抗生素在人體內殘留、蓄積，造成人體對該藥的耐藥性，破壞腸道菌群，影響人體的免疫系統(tǒng)。因此，動物源食品中的抗生素類化合物分析具有重要意義。

      今年2月開始實行國家標準《GB 31658.17--2021食品安全國家標準 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定 液相色譜－串聯質譜法》，該方法具有靈敏度高，選擇性和特異性好的優(yōu)勢，可以對低濃度的三類抗生素同時進行定量分析，滿足豬肉中此三類抗生素的檢測需求。本應用中心根據《GB 31658.17--2021》，建立了使用超高效液相色譜-三重四極桿串聯質譜儀測定豬肉中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類化合物含量快速且高靈敏度的檢測方法，為食品安全檢測提供有效技術支持。

關鍵詞：LC-MS/MS、食品、四環(huán)素、磺胺、喹諾酮、抗生素類獸殘、GB 31658.17-2021

實驗部分

儀器

表1 液相色譜串聯三重四級桿質譜儀

表2 正離子檢測化合物液相色譜串聯三重四級桿質譜儀檢測參數

試劑及標準品

      試劑：質譜級甲酸（CNW）、色譜級甲醇（Merck）；

      純水：18.2 MΩ·cm去離子水（25℃）；

      標準品：四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物標準品均購自上海安譜標準品購天津阿爾塔。

樣品前處理

      按照《GB 31658.17--2021食品安全國家標準 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定 液相色譜－串聯質譜法》“8 測定步驟”中的步驟進行樣品前處理，本次實驗選用市售豬肉做為空白基質。

檢出限

表3 四環(huán)素類、磺胺類以及喹諾酮類藥物的檢出限和定量限

      按照國標前處理方式制備豬肉基質加標樣品提取液，加標濃度分別為國標規(guī)定的方法檢出限和定量限，即2μg/kg和10μg/kg，進樣后計算信噪比，結果如表3所示，2μg/kg的樣品提取液各化合物信噪比均遠大于3，10μg/kg的樣品提取液各化合物信噪比均遠大于10。

圖2 2μg/kg豬肉基質加標樣品提取液各化合物定量離子圖譜

圖3 10μg/kg豬肉基質加標樣品提取液各化合物定量離子圖譜

測試結果

結語

    豬肉樣本經國家標準《GB 31658.17—2021》前處理后，使用LC-MS/MS系統(tǒng)測定四環(huán)素類、磺胺類以及喹諾酮類藥物殘留量。本文考察了方法的線性、檢出限、精密度以及加標回收率等，測試結果顯示各類指標均符合國標要求，使用高靈敏、高抗污染能力的LC-MS/MS系統(tǒng)，可以對動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類以及喹諾酮類藥物含量進行靈敏、準確的定量檢測。

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•    附錄

設備與耗材方案

一、EXPEC 5210配置詳情

二、標準品